| 科目責任者 | 長塩 亮 (※) |
|---|---|
| 担当者 | 長塩 亮 (※), 朽津 有紀 (※) |
| 科目概要 | ２年 （１単位・必修） [医療検査学科] |
遺伝子検査学は講義だけでは理解できない部分が相当にある。よって、実習を通して臨床検査技師として必要と思われる遺伝子検査技術（材料の調整法、様々な検査方法）を修得する。さらに、これらの方法の原理などの関連知識についても理解する。
【教育内容】
遺伝子検査法に必要な基礎的な技術や実際に使用されている検索方法等を中心に実習する。さらに、免疫染色法、in situ hybridization法も取り入れ、形態と遺伝子異常の関連性を追求する実習も展開する。
【教育方法】
各実習項目について、実習テキストを用いて方法の説明をしたのち、グループで実習を行う。実習で得られた結果について考察し、レポートにまとめる。対面とオンデマンドで行う。
| 回 | 項目 | 授業内容 | 担当者 | 日時 |
|---|---|---|---|---|
| 第1～3回 A：9/17③④⑤ B：9/23③④⑤ | 【対面】 実習全体の説明 DNA抽出（新鮮材料） | 新鮮材料（培養細胞）とホルマリン固定パラフィン包埋材料からのDNA抽出法の１日目の操作（タンパク質分解酵素処理まで）を行う。 | 長塩 亮 朽津 有紀 | |
| 第4～6回 A：9/18③④⑤ B：9/24③④⑤ | 【対面】 DNA抽出（ホルマリン固定パラフィン包埋材料） | 新鮮材料とホルマリン固定パラフィン包埋材料からのDNA抽出法の２日目の操作（エタノール沈殿を用いたDNAの精製）を行い、DNAの濃度を測定する。 | 長塩 亮 朽津 有紀 | |
| 第7～9回 | 【オンデマンド】 DNAの切断 電気泳動 | 抽出したDNAを制限酵素を用いて切断する。 切断したDNAと未処理のDNAを用いてアガロース電気泳動を行い、泳動パターンの比較を行う。 | 長塩 亮 朽津 有紀 | |
| 第10～12回 | 【オンデマンド】 PCR法（β-globin遺伝子） | 抽出したDNAを用いてPCR法での増幅を行う。PCR産物をアガロースゲル電気泳動を行い、増幅の程度を確認する。 | 長塩 亮 朽津 有紀 | |
| 第13～15回 A：9/25③④⑤ B：10/2③④⑤ | 【対面】 RNA抽出 | 新鮮材料（ヒト癌細胞株とマウス肝組織）からのRNAの抽出を行う。抽出したRNAは変性アガロースゲルを用いて電気泳動を行い、泳動パターンを比較する。 | 長塩 亮 朽津 有紀 | |
| 第16～18回 A：9/29③④⑤ B：9/30③④⑤ | 【対面】 in situ hybridization法 | ホルマリン固定パラフィン包埋組織を用いたin situ hybridization法の作業を行い、ウィルスRNAの発現を検出する。 | 長塩 亮 朽津 有紀 | |
| 第19～21回 | 【オンデマンド】 免疫染色法 | ホルマリン固定パラフィン包埋細胞・組織の切片を用いて免疫染色法を行う。 | 長塩 亮 朽津 有紀 | |
| 第22～24回 10/1③④⑤ | 【対面】 顕微鏡での観察とスケッチ | 免疫染色した切片を304実習室にて顕微鏡で観察しスケッチを行う。 | 長塩 亮 朽津 有紀 | |
| 第25～27回 | 【オンデマンド】 PCR法（免疫グロブリン重鎖遺伝子の再構成バンドの検出） | 抽出したDNAを用いて、免疫グロブリン重鎖（IGH）遺伝子の再構成バンドをPCR法により確認する。 | 長塩 亮 朽津 有紀 | |
| 第28～30回 10/6③④⑤ | 【対面】 片づけ・実習試験 | 実習で使用した器具類の片付けを行う。 実習で習った原理や手技の習得の確認のため実習試験を行う。 | 長塩 亮 朽津 有紀 |
◆実務経験の授業への活用方法◆
病院や研究所等での遺伝子検査の手法についての経験を踏まえ、実際の遺伝子検査の手技や得られた結果の評価法について概説する。
遺伝子検査学実習で行った手技について具体的に説明できる。遺伝子検査に関する実験を実施し、得られた結果を判断して評価できる。班員と協力し実験を遂行できる。
各実験毎に作成する実習レポート（50％）と、実習で行った項目全体に関する実習試験（40％）、受講態度（10％）により評価する。
＊実習レポートは全ての実習が終了後に提出し、評価終了後に返却する。
【授業時間外に必要な学習の時間： ‐ 時間】
実習内容について、予め実習テキスト・参考書で予習を行い、実習内容を理解して当日の実習に臨むこと。実習の最終日には実習内容に関する実習試験を行うので、実習後は速やかにレポートの作成に努め、実習内容をより深く理解するための復習を行うこと。
| 種別 | 書名 | 著者・編者 | 発行所 |
|---|---|---|---|
| 教科書 | 遺伝子検査学実習書 | 佐藤雄一、長塩 亮（著） | 北里大学医療衛生学部編 |
| 参考書 | 遺伝子・染色体検査学 | 奈良信雄 | 医歯薬出版 |
| 参考書 | 遺伝子検査学 | 菅野剛史、松田信義 | 医学書院 |
| 参考書 | DNA診断臨床検査技術 | 古泉快夫 | 講談社サイエンティフィック |
科目ナンバリングコード： ML304-SS07